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C0f3d30c8C0f3d30c8时间2024-06-18 10:46:55分类能源机械浏览26
导读:细胞破碎的方法及特点?流食都包括什么?细胞破碎的方法及特点?机械法:主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法,常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。常用的细胞破碎方法有反复冻融法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂处理法 。细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到……...
  1. 细胞破碎的方法及特点?
  2. 流食都包括什么?

细胞破碎方法及特点?

机械法:主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法,常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。

常用的细胞破碎方法有反复冻融法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂处理法 。

细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量生产成本实验室对组织细胞的破碎方法很多,有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。

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(图片来源网络,侵删)

细胞破碎的三种方法。

(1)酸碱处理:调节pH值,改变蛋白质的荷电性质,提高产物的溶解度。 

(2)化学试剂处理:用表面活性剂或有机溶剂(甲苯)处理细胞,增大细胞壁的通透性,降低胞内产物的相互作用,使之容易释放。

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 (3)酶溶:利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞,使细胞壁受到部分或完全破坏后,再利用渗透压冲击等方法破坏细胞膜,进一步增大胞内产物的通透性。酶溶的优点:操作温和,选择性强,酶能快速地破坏细胞壁,而不影响细胞内含物的质量,但缺点是酶的费用高,因而限制了它在大规模生产中的应用。化学渗透法与机械破碎法相比:速度低,效率差,且化学或生化试剂的添加形成新的污染,给进一步的分离纯化增添麻烦。但化学渗透法选择性高,胞内产物的总释放率低,可有效抑制核酸的释放,料液粘度小,有利于后处理。

1、高速组织捣碎 :将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。

此法适用于动物内脏组织、植物肉质种 子等。

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2、玻璃匀浆器匀浆 :先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。

3、超声波处理法 :用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在 1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应***取相应降温措施。

对超声波敏感和核酸应慎用。

4、反复冻融法: 将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。

5、化学处理法: 有些动物细胞,例如肿瘤细胞可***用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可***用溶菌酶处理效果更好。

无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸 (DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PM***)也能清除蛋白水解酥活 力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。

流食都包括什么

1 流食包括易消化和不***胃肠的食物,如稀饭、面汤、果汁、蔬菜汤等。
2 这些食物经过烹饪处理后,质地较为柔软,容易消化吸收,不会对胃肠道造成过多的负担。
3 此外,流食还可以包括一些营养丰富、易于消化的食品,如豆腐、鸡蛋羹、牛奶等,这些食物能够提供身体所需的营养物质,同时又不会对消化系统造成过多负担。

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